Контаминация в процессе культивирования грибов – одно из наиболее актуальных и сложных вопросов, с которыми сталкиваются исследователи и энтузиасты грибов. В контексте методов и подходов, предложенных экспертом в микологии, Полом Стаметсом, рассмотрим шесть ключевых векторов контаминации, оказывающих влияние на успешность культивирования.
Эти факторы, охватывающие все аспекты от воздушных спор до человеческого воздействия, подчеркивают важность соблюдения чистоты и гигиеничных норм в культивации грибов. В этом контексте рассматриваются шесть векторов контаминации, и мы более детально рассмотрим, как они влияют на результаты грибного культивирования.
1. Вы, Культиватор
Человеческое тело кишит популяциями микроорганизмов. Разнообразие грибков (включая дрожжи), бактерий и вирусов считают ваше тело своим домом. Когда вы здоровы, популяция этих микроорганизмов находятся в равновесия. Когда вы больны, одна из этих групп разрастается, выходя из-под контроля.
Следовательно, больные люди не должны находиться в стерильной лаборатории, чтобы их микроорганизмы не вырвались на свободу и не распространились до опасных размеров в лаборатории.
Наиболее часто, загрязнители распространяются в стерильной лаборатории с помощью касаний и дыхания.
Также, шелушение кожи это прямая причина. Множество культиваторов используют одноразовые перчатки для минимизации угрозы загрязнения. Пол Стаметс считает перчатки неудобными и предпочитает мыть руки антибактериальным мылом каждые 20-30 минут. Дополнительно обрабатывая их 80% изопропиловым спиртом, непосредственно перед инокуляцией и каждые несколько минут в течении всей процедуры.
2. Воздух
Воздух можно описать как океан микроорганизмов, содержащие невидимые загрязнители, которые непосредственно загрязняют стерилизованные средства при контакте с ними. Многие микроорганизмы остаются во «взвешенном» состоянии, и когда человек входит в лабораторию, он не только приносит загрязнители которые находятся в воздухе из вне, но и своим перемещением, создавая потоки воздуха, он подымает загрязнители с пола лаборатории.
Пол Стаметс дает рекомендации как можно улучшить качество воздуха в лаборатории, советует перед входом в лабораторию сделать 3 небольших помещения, которые будут отделены друг от друга дверьми, таким образом в каждой комнате будет меньше «взвешенных» микроорганизмов в воздухе чем в предыдущей, рекомендует использовать систему избыточно-давления в помещениях, а так же различные фильтра и системы рециркуляции и фильтрации воздуха на подобии Apendix I. Рекомендует также использовать UV излучения для дезинфекции помещений.
Мое мнение, что конкретно эти советы полезны, но они более полезны для тех кто занимается культивацией грибов масштабно, коммерчески и профессионально. Для любителей и энтузиастов эти советы избыточны. Если вы хотите заняться культивацией полу-профессионально, для вас целесообразней будет приобрести или сделать ламинарный поток, и перед ламинарным потоком делать все манипуляции. Также не забывая дезинфицировать помещения бактерицидной лампой. Как вариант, если есть свободные площади, можно приобрести большой гроубокс, и переоборудовать его под помещения для работы с культурами, поставить туда системы очистки и рециркуляции воздуха и т.д.
Пол Стаметс также обращает внимание на то, что воздух для комнаты, в которой вы собираетесь выращивать грибы, не требует той степени фильтрации как лаборатория. И для его очистки достаточно использовать систему водяного тумана.
3. Среда
Часто среда, для роста культуры, является источником заражения. Причиной тому является недостаточная стерилизация среды. Стандартное время стерилизация для большинства жидкий культур всего 15-20 минут, при давлении 15 psi, или 121 градус по Цельсию. Однако это время является недостаточным для эндоспорообразующих бактерий, которые находятся в популярных у культиваторов добавках. Пол Стаметс рекомендует минимум 40 минут стерилизация, при давления 15 psi, для солодового экстракта или картофельно-декстрозного агара. Как приготовить питательную среду на основе солодового экстракта.
При создании почвенных экстрактов, почву необходимо вымачивать минимум 24 часа, а затем экстрагированную воду подвергнуть стерилизации в течении 1 часа. Почвенные экстракты содержат огромное количество загрязнителей, и не надо удивляться если какая то часть из них выживет, поэтому рекомендуется простерилизовать полученный экстракт еще раз в течении 40 минут.
Рекомендуется отложить инокуляцию среды на 48-72 часа — это дает возможность оценить, заражена ли среда, и определить, стала ли она первопричиной заражения, или заражение произошло в процессе инокуляции. В случае загрязнения в течении 48-72 часа, это обычно указывает на то, что среда была недостаточно стерилизована.
4. Инструменты
В эту категорию включены все инструменты, начиная от скальпеля, ножа, заканчивая скороваркой и различными сосудами. Недостаточная стерилизация инструментов может быть прямой причиной заражения. Предпочтительнее стерилизовать скальпель или нож пламенем, чем использовать спирт или отбеливатель.
При использовании скороварки для стерилизации среды и инструментов важно помнить, что внешняя часть, стенки и ручки скороварки не подвергаются стерилизации. Перенос скороварки с места на место может привести к подхвату различных загрязнителей руками. Рекомендуется дезинфицировать скороварку перед открытием и переносом.
5. Инокулянт
Инокулянт представляет собой ткань, которую переносят, будь то часть живых грибов, мицелий из другой чашки Петри или споры. Бактерии и плесень могут заразить грибную ткань, передаваясь вместе с ней при каждом переносе. Выделение инокулянта из мицелия может быть сложным, так как многие из этих загрязняющих организмов растут быстрее, чем вновь формирующийся грибной мицелий. Культиваторы должны постоянно удалять или перемещать свой мицелий подальше от этих быстро развивающихся конкурентов.
Пример: у вас в чашке Петри, где начинает развиваться инокулянт (кусочек грибного мицелия), появилась триходерма, или черная плесень. Вам необходимо вырезать область здорового мицелия и пересадить его в другую чашку Петри. И так повторяете процедуру до тех пор, пока ваша культура не разрастется на всю чашку Петри, без конкурирующих организмов. Существует также и другие методы для очищения загрязненного мицелия.
6. Мобильные единицы загрязнения
Мобильные единицы загрязнения — это организмы которые переносят и распространяют загрязнения в лаборатории. Это живые макро-организмы действуют как транспортные средства, распространяющие загрязняющие вещества с одного места к другому. Муравьи, мухи, клещи, и в случае Пола Стаметса, мелкое двуногое потомство (т.е. дети) рассматриваются как потенциальные мобильные единицы загрязнения.
Дальше Пол Стаметс дает рекомендации что делать в таких случаях. Вся культура должна быть изъята из лаборатории, после чего проводится генеральная уборка с применением 10% отбеливателя, до тех пор пока различные насекомые не исчезнут.
Мое мнение на этот счет такое же, как и в пункте 2. Воздух. Проблема насекомых и других мобильных единиц более характерно для коммерческих и более масштабных культиваторов. Вряд ли в вашей квартире будет что-то, кроме мух и комаров, борьба с которыми крайне проста. Но опять же, на что стоит акцентировать внимание, что не стоит пренебрегать летающей и ползающей живностью в вашей домашней лаборатории.
Итог
На все указанные векторы контаминации универсально влияет еще одна переменная: время воздействия. Чем продолжительнее воздействие любого из упомянутых векторов загрязнения, тем более значительным становится его влияние. Важно осознавать, что эффективное контролирование времени воздействия требует не только быстроты и аккуратности, но и постоянного внимания к чистоте и гигиеничным процедурам.Такой подход является ключевым в обеспечении успешного контроля за векторами контаминации в процессе грибного культивирования.
Источник информации: Growing Gourmet and Medicinal Mushrooms by Paul Stamets
Желаете присоединиться к команде? Пишите нам на почту admin@sporeface.com. А если вам понравилась информация и сам портал, можете купить автору кофе buymeacoffee.com/sporeface
