Как приготовить жидкую питательную среду?

Что такое питательная среда?

Питательная среда для мицелия — это стерильная смесь воды и сахаров, которая используется для обеспечения его развития. Жидкая культура мицелия значительно облегчает процесс инокуляции субстратов и может быть использована как для инокуляции, так и для сохранения посевного материала. Так все же как приготовить жидкую питательную среду для мицелия?

В этой статье мы рассмотрим способ приготовления жидкой питательной среды для мицелия с использованием  light malt extract (сухой светлый солодовый экстракт).

Какого формата бывают питательные среды для мицелия?

При выращивании мицелия важно обеспечить оптимальные условия для их роста и развития. Для этого необходимо выбрать правильную питательную среду. Существуют различные форматы питательных сред для мицелия, такие как жидкие, твердые и полутвердые. Каждый формат имеет свои преимущества и недостатки, и выбор зависит от конкретных условий и требований к выращиванию определенных видов грибов.

Как приготовить жидкую питательную среду?

Шаг 1:

Для начала, нам нужно подготовить емкости для жидкой питательной среды. Я использую стеклянные банки объемом примерно 350мл с металлической винтовой крышкой. Объем может быть любым.

Перед использованием, тщательно вымойте банки и крышки, они должны быть чистыми и без посторонних запахов. В крышке необходимо сделать два отверстия — одно отверстие заклейте термостойким герметиком (убедитесь, что герметик подходит для использования в заданных температурных условиях, диапазон рабочих температур указан на упаковке), дайте ему застыть. Другое отверстие заклейте пластырем — оно нужно для вентиляции.

Отверстие, которое мы заклеили герметиком, будет использоваться как инокуляционный порт. Через него мы будем вводить иглу шприца.

Можно также использовать и пищевые полипропиленовые банки, но важно чтобы на самой емкости было следующее обозначение:

Для полипропиленовых емкостей алгоритм действий такой же как и для стеклянных.

Шаг 2:

Приступаем к процессу приготовления жидкой питательной среды. Для этого мы будем использовать dry light malt extract (LME;сухой светлый солодовый экстракт). Можно использовать и другие ингредиенты, содержащие сахара, такие как нектар/сироп агавы, мед или кленовый сироп, и другие. Для большинства жидких ингредиентов можно использовать следующее соотношение: 4% вещества на 100мл воды. Для LME существуют разные пропорции, но я использую 1 грамм на 600 мл воды. Для удобства использования, ниже приведена таблица.

Тщательно перемешиваем, пока ингредиенты полностью не растворятся. Кидаем в банку кусочек стекла, или металический шарик, это надо чтобы эффективно разбивать на части разросшийся мицелий, но не обязательно. Закручиваем крышки, оборачиваем банки фольгой в 1-2 слоя (можно обернуть только крышки) и ставим в скороварку на 40 минут. Если скороварки нет, то можно провести дробную стерилизацию. Для стерилизации в скороварке используем немного воды, чтобы хватило на 40 минут работы, у меня это примерно 250 мл. Обязательно поместите что-то на дно скороварки (например тряпку), чтобы банки не лопнули. По окончанию времени стерилизации оставляем скороварку остывать до комнатной температуры, затем достаем банки, если они теплые — даем им остыть до комнатной температуры. После чего фольгу можно снять.

Шаг 3:

После выполнения манипуляций изложенных выше, переходим к этапу инокуляции. Для этого можно использовать шприц со споровой взвесью, твердую питательную среду на агаре, уже имеющийся у вас жидкую питательную среду с мицелием, для каждой технологии свой метод инокуляции, в данном руководстве использовался шприц со споровой взвесью. 

Чтобы избежать контаминации, следует обеспечить стерильные условия. Для этого можно использовать самодельный стерильный бокс, сделанный из подручных материалов. Если у вас такого нет, то обеспечить стерильность будет намного сложнее. Для этого вам понадобится бактерицидная лампа. Вам надо выбрать комнату в которой вы будете проводить инокуляцию и прокварцевать помещение в течении 40-60 минут, идеально стерильного помещения все равно не будет, но шансы на контаминацию все равно уменьшается. При использовании бактерицидной лампы соблюдайте все меры предосторожности, при неправильной эксплуатации, бактерицидная лампа может причинить вред здоровью. После кварцевания помещения вы должны надеть маску, протереть руки, рабочие поверхности, банки, инокуляционный порт и шприц спиртом. 

Для инокуляции возьмите шприц в руки, снимите с него колпак, нагрейте кончик иголки с помощью зажигалки до красна, после чего проткните инокуляционный порт и вылейте 1-3 мл. Перед каждой последующей инокуляцией других банок, иголку следует нагревать до красна и протирать инокуляционный порт ватным диском, смоченным в спирте. Запомните правило: новый контакт — новая обработка. Если вы делаете всего 1 банку с жидкой питательной средой, можете спокойно выливать все содержимое шприца.

Шаг 4:

После того, как вы инокулировали банки с жидкой питательной средой споровой взвесью, нужно выставить их в инкубатор или в теплое, сухое и темное место на 7-16 дней. Температура инкубация от вашего вида мицелия (сорта гриба). Температура инкубации для псилоцибиновых грибов должна быть между 27,5 и 31 градусом, для шиитаке — от 23 до 25 градусов, для вешенки — от 22 до 25 градусов. Но есть грибы, которые могут расти при более низких (10-15 градусов Цельсия) или более высоких температурах (до 40 градусов Цельсия). Банки с жидкой питательной средой нужно периодически перемешивать (встряхивать) по мере развития, чтобы разбить мицелий на части и предотвратить слипание в один большой кусок. Первые признаки развития мицелия можно увидеть уже на 2-5 день инкубации.

Если вы не хотите делать все это самостоятельно, вы можете написать нам через страницу контакты, и заказать все необходимое по отдельности, либо уже в готовом варианте. Если вы заметили неточность, или неправильную информацию, вы можете обратиться к нам, и мы все исправим. Все необходимое для культивирования грибов вы можете найти у нас в магазине. Подписывайтесь также на нас в телеграмме.

Как приготовить зерно для мицелия и споровую взвесь:

• Как приготовить зерно для мицелия?
• Как сделать споровую взвесь

Методы выращивание грибов:

• Как вырастить псилоцибиновые грибы? Метод баклахинг
• Монотуб для выращивания грибов